Biyolojik indikatörler buhar, kuru ısı, etilen oksit ve nemli ısı sterilizasyon proseslerini kontrol etmek için geliştirilmişlerdir. Biyolojik indikatörler bir plastik tüp içine yerleştirilmiş bir filtre kağıdı taşıyıcı üzerine emdirilmiş bakteri sporları içerir. Tüp içinde, sporlar büyüdüğünde çarpıcı şekilde sarıya dönen bir renk indikatörü içeren bakteriyel büyüme için özel olarak formüle edilmiş kültür ortamı bulunduran bir cam ampul vardır. Biyolojik indikatörler 24 saat içinde (buhar) ve 48 saat içinde (etilen oksit ve nemli ısı) gözle görülür sonuçlar üretir.
1- Biyolojik indikatör AAMI Amerikan standartlarına göre etilen oksit gazının penetrasyonunu en zor hale getirmek için ağzı iki yönden kapaklı kilitli bir plastik tüp içerisinde etilen oksit sterilizatörüne atılır.
2- Biyolojik indikatör sterilizasyon işlemi bittikten sonra bir kıracak veya inkübatör üzerinde kırma yuvası varsa bastırılarak sporlar ve besiyer birleştirilir.
3- Sporlarla birleştirilen besiyerler AAMI Amerikan standartlarına göre 37 C bir inkübatör ile inkübasyona bırakılır.
4- İnkübatörde 48 saatlik inkübasyona bırakılan biyolojik indükatör tüpünde 3,6,12,24,48 saat aralıklarla renk değişikliği gözlemlenir.
5- Eğer ki kırmızı renkte bulunan biyolojik indikatör tüpü sarı renge dönmüş ise sterilizatörde sporlar ölmemiş demek ve sterilizasyon işlemi gerçekleşmemiş demektir, kırmızı renkte bulunan sporlar rengini korumuş ise sterilizasyonda herhangi bir sıkıntı yok ve sterilizasyon işlemi sağlıklı bir şekilde gerçekleşmiş demektir.
6- Kullanılmış olan biyolojik indikatörler AAMI Amerikan standartlarına göre hangi sterilizatörde kim tarafından, hangi tarihte, hangi sterilizasyon çevriminde yapıldığı kayıt altına alınarak saklanır.
7- Kayıt işleminde de biyolojik indikatör tüpü üzerindeki etiket kaldırılır ve gerekli bilgiler yazılıp ilgili dokümantasyon formuna iliştirilir.
8- Daha sonra kullanılmış olan biyolojik indikatör tüpleri normal sterilizatör çevrimine çıplak olarak atılır ve normal sterilizasyon döngüsü takip edilir. Biyolojik indikatör zorlayıcı bir düzenekle sterilizatöre atılmadığından dolayı etilen oksit gazı kolaylıkla biyolojik indikatöre nüfuz edecek ve sporlar imha edilecektir.
9- Sterilizatör çevrimine atılan biyolojik indikatör tüpleri çıkarılıp tıbbi atığa atılır.
